Anggrek Vanda sp merupakan tanaman hias bunga endemik yang menyebar luas di seluruh Indonesia. Adapun tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui Pengaruh pemberian potassium nitrate (KNO3) dan Thiamin terhadap eksplan anggrek Vanda sp pada media murashige and Skoog secara in-vitro. Rancangan yang digunakan dalam penelitian ini adalah Rancangan Acak Lengkap (RAL) Faktorial terdiri dari 2 taraf perlakuan (K= KNO3 dan T= Thiamin) dengan 3 kali ulangan.Yaitu : K0 (Tanpa KNO3), K1 (KNO3 1.700 mg/l) K2 (KNO3 1.900 mg/l), K3 (KNO3 2.100 mg/l), T0 (Tanpa Thiamin), T1 (Thiamin 0,1 mg/l), T2 (Thiamin 0,5 mg/l), T3 (Thiamin 0,9 mg/l). Berdasarkan hasil penelitian Pemberian berbagai konsetrasi Potassium Nitrate (KNO3) 1.900 mg/l media MS secara tunggal berpengaruh nyata terhadap semua parameter, dimana perlakuan terbaik terdapat pada K2 dengan rata-rata jumlah tunas 4,08 buah dan tinggi tunas 1,44 cm, jumlah akar 5,56 buah, panjang akar 1,35 cm, perlakuan K3 berpengaruh nyata untuk parameter jumlah daun dengan rata-rata 4,50 helai. Untuk Pemberian berbagai konsetrasi Thiamin secara tunggal berpengaruh nyata terhadap parameter jumlah daun (4,33 helai) dengan perlakuan terbaik terdapat pada T2, untuk perameter jumlah akar dengan rerata (5,06 buah) perlakuan terbaik terdapat pada T3. Interaksi pemberian KNO3 dan Thiamin memberikan pengaruh nyata terhadap parameter jumlah daun (5,11 buah) pada perlakuan K3T2 dan jumlah akar (6,22 buah) pada perlakuan K2T1 eksplan anggrek Vanda Sp.